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Dipartimento di

 
 

Produzione, ingegnerizzazione e caratterizzazione biochimica di proteine ricombinanti  

E’ disponibile una facility aggiornata allo stato dell’arte per la produzione e la caratterizzazione di proteine ricombinanti. E’ presente la strumentazione e il personale competente per la progettazione e la costruzione di sistemi di espressione proteica in batteri e lieviti, la fermentazione su scala pilota, la purificazione ad alte prestazioni e la caratterizzazione strutturale e funzionale di proteine. Il team di ricerca ha inoltre una lunga esperienza nello sviluppo di saggi enzimatici e nello studio dei loro meccanismi mediante approcci combinati di ingegneria proteica, cristallografia a raggi X, spettroscopia in assorbanza e in fluorescenza, studi cinetici in condizioni aerobiche e anaerobiche, con particolare riferimento ad enzimi ossidoriduttivi.

Attività:

•Sovraproduzione di proteine ricombinanti, compresi enzimi, in microorganismi ospite.

•Ingegnerizzazione proteica mediante mutagenesi casuale o sito-specifica. Screening delle varianti proteiche.

•Purificazione di proteine.

•Caratterizzazione strutturale e funzionale di proteine.

•Messa a punto di saggi enzimatici in vitro(misurazioni “in continuo” di tipo spettrofotometrico, fluorimetrico o radiometrico; e “in discontinuo” con separazioni mediante FPLC/TLC/HPLC).

•Studi meccanicistici e di inibizione di enzimi ( cinetica allo stato stazionario e pre-stazionario; spettroscopia in assorbanza e/o fluorescenza; dynamic light scattering) in condizioni aerobiche o anaerobiche.

La facility è rivolta ai settori di mercato della chimica fine, dei biocarburanti, della farmaceutica e degli enzimi per uso industriale.

Per maggiori informazioni:

Alessandro Aliverti (alessandro.aliverti@unimi.it)

Maria Antonietta Vanoni (maria.vanoni@unimi.it)

 


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